一种杀虫球孢白僵菌工程菌构建方法

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专利申请号：

CN201911124752.8

专利类型：

发明专利

技术分类：

C12N15/66(2006.01)I

专利有效期：

2039-11-18

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专利信息

专利名称：一种杀虫球孢白僵菌工程菌构建方法

商品编号：5826229

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申请日期：2019-11-18

公开/公告号：CN110669777B

授权公告日/公开日：2023-09-12

申请/专利权人：徐州***院

发明/设计人：李同***王陶

主分类号：C12N15/66(2006.01)I

IPC分类号：C12N15/66(2006.01)I;C12N15/80(2006.01)I

说明书摘要免费下载摘要

本发明公开了一种杀虫球孢白僵菌工程菌构建方法，设计引物从pUC57‑AaIT载体中PCR扩增AaIT基因，经酶切、纯化和pbarGPEl构建pbarGPEl‑AaIT载体；用引物扩增出GpdA‑AaIT‑TrpC表达盒；用Not1单酶切pGPS3Ben‑bbchit1并去磷酸化，与用Not1酶切的GpdA‑AaIT‑TrpC连接，转化筛选获得pGPS3Ben‑bbchit1‑AaIT表达载体，将其导入根癌农杆菌感受态细胞中获得阳性转化子菌落；球孢白僵菌孢子悬液和含pGPS3Ben‑bbchit1‑AaIT载体的根癌农杆菌液混合，经固体IM培养基、CPZ选择培养基筛选获得转化球孢白僵菌工程菌株。本发明构建的球孢白僵菌工程菌株可制备高效杀虫生物防治剂，对环境无污染且防治效果良好，适合在生物防治技术领域推广。

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