一种可进行植物多基因编辑的病毒载体及其构建方法和应用
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专利申请号:
CN202010217461.X
专利类型:
发明专利
技术分类:
C12N15/83(2006.01)I
专利有效期:
2040-03-25
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专利信息
专利名称:一种可进行植物多基因编辑的病毒载体及其构建方法和应用
商品编号:5805322
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申请日期:2020-03-25
公开/公告号:CN111334527A
授权公告日/公开日:2020-06-26
申请/专利权人:
江苏***学
发明/设计人:
刘**
主分类号:C12N15/83(2006.01)I
IPC分类号:C12N15/83(2006.01)I;A01H5/00(2018.01)I;A01H5/10(2018.01)I;A01H6/82(2018.01)I;C12Q1/6895(2018.01)I
说明书摘要免费下载摘要
本发明提供了一种可进行植物多基因编辑的病毒载体及其构建方法和应用,涉及植物基因编辑技术领域;将tRNA、sgRNA依次连接构成单元序列,连接载体pCE2;使用“金门”克隆方法,将靶标基因的靶序列插入到每个单元序列的tRNA与sgRNA之间,并且多个所述单元序列串联排列,此串联序列插入到TRV2病毒载体中,TRV侵染过量表达Cas9蛋白的植株后,组装有不同目标靶序列的tRNA‑sgRNA表达序列单元获得转录,完成多基因编辑过程,可实现多个基因的编辑或者根据目标进行不同基因的组合编辑。本方法使植株中能翻译成正常蛋白序列的mRNA表达量更低、基因沉默表型更稳定,且可同时精确靶向敲除多个基因。
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