一种提取鱼类肠道微生物基因组DNA的高温复合法
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专利申请号:
CN201610086539.2
专利类型:
发明专利
技术分类:
C12N15/10(2006.01)I
专利有效期:
2036-02-16
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专利信息
专利名称:一种提取鱼类肠道微生物基因组DNA的高温复合法
商品编号:5771280
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申请日期:2016-02-16
公开/公告号:CN105483120B
授权公告日/公开日:2019-01-22
申请/专利权人:
天***院
发明/设计人:
孙敬***秀彩
主分类号:C12N15/10(2006.01)I
IPC分类号:C12N15/10(2006.01)I
说明书摘要免费下载摘要
本发明公开了一种提取鱼类肠道微生物基因组DNA的高温复合法,首先,同时应用溶菌酶法与超声波法,使鱼类肠道各类群微生物适当破壁。超声波物理破壁的条件为150‑250w,超声2‑3s,间隔5s,循环50‑60次。其次,将超声波处理后的样品与溶菌酶在55‑65℃温度的水浴恒温振荡器中共同孵育30min,与RNase A共同孵育的温度为27‑32℃。此方法利用恰当的温和超声波条件使各种微生物适当破壁,避免基因组DNA断裂降解。通过设置溶菌酶、RNase A与样品孵育的特定温度范围,即可以提高溶菌酶的裂解效果,又可避免组织和细胞中DNA酶降解基因组DNA。操作简单、提取的基因组DNA完整、降解率低,根据提取的DNA所鉴定出的微生物种类能够真实反映鱼类肠道微生物组成结构。
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