数字市场 专利库 一种仔猪小肠上皮细胞分级分离方法
一种仔猪小肠上皮细胞分级分离方法

一种仔猪小肠上皮细胞分级分离方法

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专利申请号：
CN201611202223.1
专利类型：
发明专利
技术分类：
C12N5/071(2010.01)I
专利有效期：
2036-12-23
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专利信息
专利名称：一种仔猪小肠上皮细胞分级分离方法
商品编号：5764319
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申请日期：2016-12-23
公开/公告号：CN106676059B
授权公告日/公开日：2019-11-15
申请/专利权人： 湖南***学
发明/设计人： 杨焕***建中
主分类号：C12N5/071(2010.01)I
IPC分类号：C12N5/071(2010.01)I
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本发明公开了一种仔猪肠上皮细胞分级分离方法，包括以下步骤：1、取长度为60‑90cm小肠肠段，肠腔中灌注37℃预热充氧磷酸缓冲液100‑150mL，两端用止血钳夹住后，于37℃水浴振荡器中孵育30分钟，震荡速度为70转/分钟；2、弃磷酸盐缓冲液，灌注细胞分离液100‑150mL，继续于37℃水浴振荡器中分别孵育2.5小时，震荡速度为70转/分钟，分别于不同时间点收集细胞分离液并灌注新的细胞分离液；3、所收集细胞分离液于4℃、400g离心10分钟，所得沉淀即为肠上皮细胞，根据孵育时间由前至后收集的细胞依次为沿隐窝‑绒毛轴从绒毛顶端至隐窝底部不同部位细胞。本发明分离的细胞为体内研究小肠上皮细胞分化机制、营养吸收代谢和相关疾病药物开发提供了新的技术方法。

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